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实验室可以是分散形式,也可以是组合形式。完成一组 PCR 实验,通常应经过试剂配制、样品处理、核酸扩增及产物分析四个实验过程,若实验工艺需要,还应增加样品粉碎过程。
一、分散形式 PCR 实验室
所谓分散形式 PCR 实验室,是指完成上述实验过程的实验用房彼此相距较远,呈分散布置形式。对于这种布置形式的 PCR 实验室,由于各个实验之间不易相互干扰,因此无需特殊条件要求。
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二、组合形式 PCR 实验室
所谓组合形式 PCR 实验室, 是指完成 PCR 四个实验过程的实验用房相邻布置,组成独立实验区域的形式。对于组合形式 PCR 实验室,由于各个实验间集中布置,容易造成相互干扰,因此,对总体布局以及屏障系统具有一定的要求。各室在入口处设缓冲间,以减少室内外空气交换。试剂配制室及样品处理室宜呈微正压,以防外界含核酸气溶胶的空气进入,造成污染;核酸扩增室及产物分析室应呈微负压,以防含核酸的气溶胶扩散出去污染试剂与样品。
如果使用荧光 PCR 仪,扩增室和产物分析室可以合并。
若房间进深允许,可设 PCR 内部专用走廊。需要指出的是在减少室内外空气交换方面,缓冲间比专用走廊更有意义。
各个区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、人流与气流,形成单向流程的保护屏障,避免实验之间的相互干扰,防止核酸气溶胶对实验过程造成污染产生假性结果。
PCR实验室的空气流向必须严格按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区空气压力逐渐递减方式进行,防止扩增产物顺空气气流进入扩增前的区域。需要严格的通风设计,若通风设计不合理,会使风速流向混乱,甚至危害人们健康。


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