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PCR核酸检测实验室气流控制原理
PCR是基因扩增实验室的简称,目前,PCR实验室没有关于设计与建设的国家标准规范,比较详细的官方文件是推荐性标准《检验检测实验室设计与建设技术要求》、卫生部办公厅的红头文件《 机构临床基因扩增检验实验室管理办法》通知,其中的重点都是关于如何管理PCR基因扩增实验室,对于具体如何设计与建设基因扩增实验室的描述比较少,比如:双走廊的结构的PCR公共走廊、独立缓冲间室内压力确定,四个功能区具体压力应为多少,也没有典型布局图供参考,许多从业者感觉
具体操作的时候感觉比较迷茫。这里提供禄米PCR洁净实验室的建设经验供参考:
一、禄米PCR洁净实验室的公共走廊应为微正压,人流应单向朝着产物分析区。设计与建设时可采用一侧门只能进、另一侧门只能出的方式实现。
二、关于独立缓冲间压力。有些从业者认为独立缓冲间应为正压,认为正压起到截断作用,才能确保气流不会交叉污染。我们认为这个观点是错误的,因为正压房间的气流向两侧房间分流,缓冲间存在污染的可能,正压并不可靠。负压的缓冲间可让两侧房间汇流排出室外,即使缓冲间或公共走廊有污染,也因为合流排出室外、避免分流到对面房间而造成交叉污染。
三、关于是否需要空气洁净处理的争论。 这个争议很久了,我们认为日常的卫生清洁、紫外灭菌已经足够。现代成熟的PCR扩增技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且是封闭式操作的,气溶胶污染大大降低,与常规PCR相比,它已经有效解决PCR污染问题、自动化程度高,目的片段的浓度要远远大于环境里随机片段的浓度. 所以环境并不需要特别的洁净过滤处理,关键措施是避免与其它功能间交叉污染。
争论其实有点纠结,全自动的荧光定量PCR是封闭运行的,气溶胶污染大大降低,密闭房间的污染风险很小,但是也并非万无一失,所以实验室整体装修的外窗还是建议不要做固定密闭窗,这样一旦污染,*简单的做法就是开启外窗通风,稀释污染物,同时紫外灯长时间照射、换掉全部耗材、并用次氯酸钠等全面消毒擦洗。
以上就是禄米PCR洁净实验室整体装修中的一些经验总结,希望对PCR基因扩增从业者有所帮助。
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