苏木素-伊红染色液使用说明书

Hematoxylin-Eosin Stain Manual

【性状与成分】

本品由苏木素染液（A液）、伊红染液（B液）、分化液（C液）、返蓝液（D液）等4部分构成，苏木素染液为深紫红色澄明液体，有乙酸刺激性气味，主要成分为苏木素色素经氧化生成的三氧化苏木红；伊红染液为橘黄绿色澄明液体，具有乙醇特异芳香气味，主要成分为伊红Y；分化液为无色澄明液体，具有乙醇特异芳香气味，由乙醇、蒸馏水等组成；返蓝液为无色澄明液体，下层有少许沉淀，由碳酸锂、蒸馏水组成。

【原理与用途】

本品为染色液，适用于切片或涂片的细胞核和细胞浆形态观察前的染色。细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料苏木素氧化物三氧苏木红的亲和力较强，而细胞浆则相反，因含有碱性物质而与酸性染料伊红的亲和力较大，经H-E染色后，细胞核被染成紫蓝色，细胞浆、肌纤维、胶元纤维等染成不同程度的红色，红细胞则染成橙红色。H-E染色法是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的 基本的染色方法。

【使用方法】

1. 厚2～6um的石蜡切片浸入浸蜡脱蜡透明液中脱蜡5～15分钟，可分两步操作；

2. 分别经95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇、蒸馏水中处理各1～5分钟，达到水化，甩干；

3. （涂片不需1、2两步处理）浸入苏木染液中5～10分钟，水冲洗2～3分钟，甩干；

4. 浸入分化液中数秒至几十秒，水洗2～3分钟，甩干，达到分色效果；

5. 浸入返蓝液中数秒，水洗2～3分钟，甩干，可使细胞核着色紫蓝色更鲜艳；

6. 浸入伊红染液中1～5分钟，水洗1～3分钟，甩干；

7. 分别经70%乙醇、80%乙醇、95%乙醇、无水乙醇中各处理1分钟，达到脱水；

8. 浸入浸蜡脱蜡透明液中1～2分钟；

9. 封片，镜检。

【染色结果】

细胞核蓝紫色，细胞质、间质、各种纤维类呈现不同程度的红色。

【注意事项】

1.      使用场所应通风，并远离火源；

2. 苏木素染液表面产生一层氧化膜、底部产生少许沉淀，为硫酸铝钾结晶，属正常现象，使用前除去氧化膜，并定期过滤；

3. 冬季气温较低时苏木素染液不易着色，可适当延长染色时间；

4. 分色时间不宜过长，可镜检控制，直至细胞核及核内染色质清晰为止（约数10秒），时间过长则细胞核着色较淡；

5. 浸入返蓝液中只需数秒并水洗充分，时间过长或水洗不充分则细胞核染为深黑色；

6. 伊红若着色困难，可在每100毫升伊红染液中加入1～2滴冰醋酸，促使着色并不易脱色；

7. 染色操作的第7步，浸入不同浓度的乙醇溶液中时间不宜过长，尤其是低浓度乙醇溶液可使胞浆着色的伊红脱色；

8. 涂片与印片染色方法是：经固定、水洗后从石蜡切片染色第三步起依法操作。

【规    格】 100mL/瓶；500mL/瓶；1000mL/瓶

【储    存】  密封，阴凉处保存 

【有效 期】 未开封条件下储存，有效期1年

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